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深入理解SILAC标记对质谱灵敏度的影响

定量策略的选择直接决定了蛋白质组学研究实验结果的准确性与可重复性。SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)作为一种代谢性稳定同位素标记方法,因其标记效率高、定量偏差小而被广泛用于哺乳动物细胞系的定量蛋白质组学研究。然而

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SILAC标记结合质谱技术在蛋白表达研究中的优势解析

精准定量蛋白表达水平是理解细胞信号转导、疾病发生机制和药物作用靶点的关键。然而,蛋白表达调控复杂,涉及多层次的动态变化,单靠传统免疫印迹(Western blot)等方法,往往难以满足高通量、定量准确和跨样本比较的需求。SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino a

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SILAC技术优缺点全解析

蛋白表达定量是现代生物学研究的核心任务,广泛应用于信号转导机制解析、药物靶点发现、疾病标志物筛选等领域。随着质谱技术的发展,多种定量策略被提出。其中,SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)因其内源性标记方式、高度可重

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如何利用SILAC揭示动态蛋白表达变化

蛋白质在不同生理状态、信号刺激或药物干预下的表达动态变化,是理解细胞调控网络与机制性事件的关键入口。相比终点式检测方法,动态蛋白组学技术强调在多个时间点捕捉变化过程本身,而非仅观察结果差异。SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell cu

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基于SILAC的质谱定量蛋白组学分析

随着大规模质谱技术的发展,蛋白组学研究正逐步从“鉴定型”向“定量型”转变。相比蛋白检测方法,如Western blot或ELISA,基于质谱的定量蛋白组学具有通量高、精度高、覆盖范围广等特点。在众多定量策略中,SILAC以其高精度、低误差和良好的批次一

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乳酰化与其他翻译后修饰的相互作用

乳酸(Lactate)曾被认为是糖酵解的“代谢废物”,但近年来的研究彻底改写了这一观念。2019年,Zhang等人在Nature首次报道了组蛋白乳酰化(Histone Lactylation),揭示乳酸可通过共价修饰组蛋白赖氨酸残基,参与表观遗传调控。这一发现为翻译后修饰(P

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乳酰化修饰如何影响蛋白-分子结合?

蛋白质-分子结合(Protein-molecule interaction)是实现生物学功能的基础过程之一,涉及信号转导、转录调控、底物识别、复合物组装等核心生理活动。翻译后修饰(PTMs)通过对氨基酸残基的共价修饰,能够显著调节蛋白的空间构象、化学性质和结合能力。作为近年来新发现的一种PTM类型,

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乳酰化蛋白质组学分析:从富集到鉴定的全过程

乳酰化(Lysine Lactylation, Kla)是近年来发现的重要翻译后修饰之一,已被证实在基因表达调控、免疫代谢、肿瘤生物学等领域发挥关键作用。然而,作为一种低丰度、难检测的酰基化修饰,乳酰化研究对实验技术提出了更高要求。如何从海量蛋白质中精准捕获乳酰化位点?如何实现高通量、高分辨率的定性

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用DIA技术解读乳酰化修饰与疾病机制的深度关联

乳酸早年被视为“代谢废物”,如今却被认为是细胞命运的重要信号分子。特别是在2019年组蛋白乳酰化(Histone lactylation)首次被发现之后,乳酰化作为一种赖氨酸翻译后修饰(PTM),迅速受到生物医学界关注。它在调节免疫应答、肿瘤代谢重编程、慢性炎症反应等过程中展

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蛋白质乳酰化修饰的原理及其生物学意义

翻译后修饰(Post-translational modification, PTM)是调控蛋白质功能、定位及相互作用的核心机制。在磷酸化、乙酰化、泛素化等经典修饰之外,近年来科学家在不断揭示一类新兴的修饰形式——赖氨酸乳酰化修饰(lysine lactylation, Kl

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